Hvad er forskellen mellem nitrocellulose og PVDF-membran

Mens både nitrocellulose- og PVDF-membraner anvendes til Western blotting og aminosyreanalyse, er nitrocellulose ideel til påvisning af proteiner med lav molekylvægt, mens PVDF er mere egnet til påvisning af proteiner med højere molekylvægt.

1. Hvad er en nitrocellulosemembran?
2. Hvad er en PVDF-membran?
3. Hvordan bruger man nitrocellulosemembran?
4. Kan protein passere gennem PVDF-membran?
5. Hvad er fordele og ulemper ved PVDF og nitrocellulosemembraner?
6. Hvad bruges nitrocellulose til?
7. Hvordan opbevarer du PVDF-membraner?
8. Hvad står PVDF for?
9. Hvordan påføres PVDF-belægning?
10. Hvad er porestørrelsen af ​​nitrocellulose?
11. Hvorfor lægger du PVDF-membran i blød i methanol?
12. Hvorfor var det nødvendigt at overføre til PVDF-membranen?

Hvad er en nitrocellulosemembran?

Nitrocellulosemembraner er en populær matrix, der anvendes i proteinblotting på grund af deres høje proteinbindingsaffinitet, kompatibilitet med en række påvisningsmetoder (kemiluminescens, kromogen og fluorescens) og evnen til at immobilisere proteiner, glykoproteiner eller nukleinsyrer.

Hvad er en PVDF-membran?

Polyvinylidenfluorid (PVDF) membraner binder biomolekyler gennem hydrofobe interaktioner. Membranporer øger overfladebindingsarealet, mens størrelsen af ​​bundne proteiner begrænses. ... Det har en højere proteinbindingsevne og en højere retention end 0,45 µm membraner.

Hvordan bruger man nitrocellulosemembran?

Nitrocellulose — Anbring membranen direkte i en lav skål indeholdende 50 ml 1X overføringsbuffer i flere minutter. Filterpapir - Blød filterpapiret i blød i 1X Transfer Buffer umiddelbart inden brug. Gel — Brug gelen straks efter kørslen.

Kan protein passere gennem PVDF-membran?

50-60%, da de faktisk kan passere overføringsmembranen og gå tabt. For større proteiner skal du nedsætte procentdelen af ​​din gel for at øge proteinmobiliteten. ... Du kan også lave en simpel test af protein-gennemblæsning ved at placere en anden membran bag din primære membran.

Hvad er fordele og ulemper ved PVDF og nitrocellulosemembraner?

PVDF har en proteinbindende kapacitet på 170 til 200 μg / cm² mens nitrocellulose har en proteinbindende kapacitet på 80 til 100 μg / cm². Da PVDF har en højere proteinbindingsevne, tilbyder den også højere følsomhed.

Hvad bruges nitrocellulose til?

Guncotton eller nitrocellulose (også kendt som trinitrocellulose og cellulosenitrat) er et mildt eksplosivt stof, der anvendes i raketter, drivmidler, trykfarvebaser, læderfinish og celluloid (en blanding af nitrocellulose og kamfer; først brugt til fremstilling af billardkugler).

Hvordan opbevarer du PVDF-membraner?

For at opbevare PVDF-membraner i lang tid skal de stables i ikke-biologisk nedbrydeligt materiale med en temperatur ~ 4 ° C. Det er værd at nævne, at membraner skal tørres fuldstændigt, før de opbevares.

Hvad står PVDF for?

PVDF er forkortelsen for polyvinylidenfluorid, som også kan kaldes PVF2. Denne polymer er en del af en klasse af materialer kendt som fluorcarboner eller fluorpolymerer, som er kendetegnet ved høj termisk stabilitet og fremragende kemisk resistens.

Hvordan påføres PVDF-belægning?

PVDF-spraybelægning bruger en membranpumpe eller en stempelpumpe til at påføre tryk og statisk elektricitet til sprøjtning. Pulverbelægningen sprøjtes ved omrystning eller indånding, og elektrostatisk pulver sprøjtes på pistolens mund. Tørring af PVDF kan være både naturlig udjævningstørring og bagning.

Hvad er porestørrelsen af ​​nitrocellulose?

Bio-Rads 0,2 µm porestørrelse nitrocellulosemembran er tæt 100% nitrocellulose. Ren nitrocellulose er den hyppigst anvendte membran til overførsel af både proteiner og nukleinsyrer.

Hvorfor lægger du PVDF-membran i blød i methanol?

En kort skylning (15-30 sekunder) i methanol (eller anden 100% alkohol (ethanol eller isopropanol)) før vestlig overførsel vil "hydrere" membranen og tillade forbedret overførsel og proteinbinding. Nitrocellulosemembraner er hydrofile, så de kan hydratiseres fuldstændigt af vandige buffere.

Hvorfor var det nødvendigt at overføre til PVDF-membranen?

Når elektroforese er afsluttet, skal proteiner overføres fra gelen til en passende membran til antistoffarvning og påvisning. PVDF er generelt bedre for proteiner med lav molekylvægt. ... Denne membran kan købes i forskellige porestørrelser.