Flyde

cytometri-protokol

cytometri-protokol

Flowcytometri (FACS) farvningsprotokol (celleoverfladefarvning)

  1. Hvad bruges flowcytometri til?
  2. Hvad er princippet om flowcytometri?
  3. Hvad kan flowcytometri måle?
  4. Hvordan pletter du celler til flowcytometri??
  5. Kan flowcytometri opdage døde celler?
  6. Kan flowcytometri detektere leukæmi?
  7. Hvorfor bruges laserlys i flowcytometri?
  8. Hvordan bruges flowcytometri i hæmatologi?
  9. Hvordan repræsenterer du flowcytometrodata?
  10. Kan flowcytometri detektere lymfom?
  11. Hvor lang tid tager flowcytometrisk resultater?
  12. Hvordan kompenserer du flowcytometri?

Hvad bruges flowcytometri til?

Flowcytometri er en laboratoriemetode, der bruges til at detektere, identificere og tælle specifikke celler. Denne metode kan også identificere bestemte komponenter i celler. Denne information er baseret på fysiske egenskaber og / eller markører kaldet antigener på celleoverfladen eller inden i celler, der er unikke for den celletype.

Hvad er princippet om flowcytometri?

Det grundlæggende princip for flowcytometri er passage af celler i en enkelt fil foran en laser, så de kan detekteres, tælles og sorteres. Cellekomponenter mærkes fluorescerende og exciteres derefter af laseren for at udsende lys ved varierende bølgelængder.

Hvad kan flowcytometri måle?

Cytometri er i sin reneste form måling af cellekarakteristika, som kan omfatte cellestørrelse, celletal, cellecyklus og mere. Denne teknik giver forskere mulighed for at få meget specifikke oplysninger om individuelle celler.

Hvordan pletter du celler til flowcytometri??

Fortynd det relevante fluorokrom-mærkede sekundære reagens i 100 µL flowcytometri-farvningsbuffer og tilsæt til cellerne. Inkuber i mindst 30 minutter ved 2-8 ° C eller på is. Beskyt mod lys. Vask cellerne ved at tilføje Flow Cytometry Farvning Buffer.

Kan flowcytometri opdage døde celler?

Tab af membranintegritet er en endelig indikator for celledød i flowcytometriske assays. Celler, der udelukker et dødt cellefarvestof, betragtes som levedygtige, mens celler med en kompromitteret membran tillader farvestoffet inde i cellen at plette en intern komponent og identificerer således cellen som død.

Kan flowcytometri detektere leukæmi?

Flowcytometriimmunophenotyping kan udføres på blod, knoglemarv eller andre prøver for at give denne yderligere information. Det kan detektere normale celler såvel som unormale celler, hvis mønster af markører typisk ses med specifikke typer leukæmi og lymfom.

Hvorfor bruges laserlys i flowcytometri?

Lasere anvendes i flowcytometri som excitationskilde for fluorofor-mærkede celleprøver. Ofte er der behov for flere laserfarver for at karakterisere flere cellulære egenskaber.

Hvordan bruges flowcytometri i hæmatologi?

Flowcytometri er blevet brugt til nøjagtigt at identificere og fænotype modtagerens røde blodlegemer (44). Flowcytometri bruges i stigende grad i blodbanken til at vurdere leukocytforurening i leukocytreducerede blodprodukter (45) (46).

Hvordan repræsenterer du flowcytometrodata?

Flowcytometrodata er typisk repræsenteret på en af ​​to måder: histogrammer, der kun måler eller sammenligner en enkelt parameter, og prikdiagrammer, der sammenligner 2 eller 3 parametre samtidigt på et to- eller tredimensionelt spredningsdiagram.

Kan flowcytometri detektere lymfom?

Flowcytometri kan diagnosticere klassisk Hodgkin-lymfom i lymfeknuder med høj følsomhed og specificitet.

Hvor lang tid tager flowcytometrisk resultater?

Disse mønstre sammenlignes med normale mønstre for at bestemme betydningen af ​​resultaterne. Testen tager cirka tre timer og består i farvning af cellerne, erhvervelse af cellerne på et flowcytometer og derefter få en dygtig teknolog til at analysere de resultater, der er gemt i en computerfil.

Hvordan kompenserer du flowcytometri?

Sådan kompenseres et 4-farvet flowcytometrieksperiment korrekt

  1. 4 trin til at kompensere for et 4-farvet eksperiment. ...
  2. Vælg den korrekte transportør til kompensation. ...
  3. Trin 2: Indsaml dataene og sørg for, at der er et tilstrækkeligt antal begivenheder. ...
  4. Beregn kompensation korrekt. ...
  5. Anvend kompensationsværdierne og inspicer resultaterne.

Tid realtid pcr vs pcr
realtid pcr vs pcr
Traditionel PCR er gået fra påvisning ved slutpunktet af reaktionen til påvisning, mens reaktionen finder sted. Realtidskemi giver mulighed for påvisn...
Forskellen mellem aerob og anaerob respiration
Aerob: Aerob respiration finder sted i mitokondrier og kræver ilt og glukose og producerer kuldioxid, vand og energi. (glukose + ilt -> kuldioxid +...
primær cellekultur
Primær cellekultur er ex vivo-kulturen af ​​celler, der er frisk opnået fra en multicellulær organisme, i modsætning til kulturen af ​​udødeliggjorte ...